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샘플 성능: | 닭고기, 돼지고기, 오리고기 | 감도(ppb): | 0.5ppb |
---|---|---|---|
사양: | 96웰/키트 | 키워드: | MQCA ELISA 테스트 키트 |
유형: | 진단 ELISA 키트 | 저장: | 2-8℃에서 보관, 얼지 않음. |
강조하다: | MQCA 진단 ELISA 키트 96 Wells/키트,치킨 진단 ELISA 키트,돼지고기 테스트 키트 0.5 Ppb 96 Wells/키트 |
닭 돼지 오리용 MQCA ELISA 테스트 키트 96웰/키트 감도 0.5ppb
1. 원리
이 테스트 키트는 샘플에서 MQCA 검출을 위한 경쟁적 효소 면역분석법을 기반으로 합니다.커플 링 항원은 마이크로 웰 스트라이프에 미리 코팅되어 있습니다.샘플의 MQCA와 마이크로웰 스트라이프에 사전 코팅된 커플링 항원은 항-MQCA 항체를 놓고 경쟁합니다.효소접합체 첨가 후 TMB 기질을 첨가하여 착색한다.샘플의 광학 밀도(OD) 값은 샘플의 MQCA와 음의 상관관계를 가집니다.이 값은 표준 곡선과 비교되며 이후에 MQCA 농도를 얻습니다.
2. 기술 사양
감도:0.5ppb
인큐베이터 온도: 25℃
인큐베이터 시간: 30분~15분
탐지 한계:
조직 1ppb
교차 반응률:
MQCA 100%
올라퀸독스 <0.1%
회수율:
조직 85%±10%
3. 구성품
1 | 미세 웰 스트립 | 각각 8개의 제거 가능한 웰이 있는 12개의 스트립 | |
2 | 6× 표준 용액(각각 1mL) | 0ppb | 0.5ppb |
1.5ppb | 4.5ppb | ||
13.5ppb | 40.5ppb | ||
삼 |
농축 효소 결합체 |
1ml | 빨간 모자 |
4 | 항체 작업 솔루션 | 8ml | 파란색 모자 |
5 | 기판 A | 7ml | 하얀 모자 |
6 | 기판B | 7ml | 검은 모자 |
7 | 솔루션 중지 | 7ml | 노란 모자 |
8 |
재용해 솔루션 |
50ml | 투명 캡 |
9 | 20배 농축 세척 버퍼 | 40ml | 하얀 모자 |
4. 필요하지만 제공되지 않는 자료
1) 장비: 마이크로플레이트 판독기(450nm/630nm), 균질기, 오실레이터, 원심분리기, 측정 피펫, 질소 건조 장치 및 저울(감도 역수 0.01g), 인큐베이터.
2) 마이크로피펫터: 단일 채널 20~200µL 및 100~1000µL 및 다중 채널 30~300µl;
3) 시약: 에틸 아세테이트, n-헥산, HCl, NaCl, CH3CN
5. 샘플 전처리
지침
모든 종류의 샘플을 전처리하기 전에 다음 사항을 처리해야 합니다.
1) 실험에는 일회용 팁만 사용할 수 있으며 다른 시약을 흡수하는 경우에는 팁을 교체해야 합니다.
2) 실험 전 각 실험기구는 실험결과에 지장을 주는 오염을 방지하기 위하여 실험용구의 청결상태를 확인하고 필요시 재세척하여야 한다.
샘플 준비
1) 시료추출물(2~8℃에서 1개월간 보관): 진한 HCl 8.6ml를 취하여 500ml에 탈이온수를 첨가한 다음 NaCl 10g을 첨가하여 시료추출물을 얻는다.
5.1가축 및 가금류 조직(닭, 오리, 돼지고기):
1. 균질화된 시료 2±0.05g을 50ml 원심분리기 튜브에 넣습니다.
2. 샘플 추출물 4mL를 추가하고 1분 동안 완전히 흔듭니다.
3. 에틸 아세테이트 4ml와 CH3CN 2ml를 추가하고 10초 동안 적절하게 흔듭니다.실온(20~25℃)에서 4000r/min로 10분 동안 원심분리(참고: 이 단계는 10초 동안만 흔들면 됩니다. 너무 오래 흔들면 유화로 이어집니다. 유화가 나타나면 특정 상층액을 취한 다음 튜브를 5초 동안 가볍게 흔듭니다. , 다시 원심 분리하면 충분한 상등액을 얻을 수 있습니다);
4. 3mL의 상층 유기상을 투명한 용기에 넣고 아래에서 질소 또는 공기로 건조합니다.
56℃수조;
5. 1ml N-헥산을 첨가하고, 30초 동안 진탕시킨 다음, 재용해 용액 0.5ml를 첨가하고, 30초 동안 진탕 및 완전히 혼합한다;실온(20-25℃)에서 5분 동안 4000 r/min로 원심분리합니다.
6. 상위층 유기상을 제거합니다. 분석을 위해 하위층 50µL를 취합니다.
샘플 희석 배수: 0.5
6. ELISA 절차
6.1 지침
1) 사용하기 전에 모든 시약과 마이크로웰 스트립을 실온(20-25℃)에 두십시오.
2) 사용 직후 모든 시약을 2-8℃로 되돌립니다.
3) ELISA 분석의 재현성은 대부분 플레이트 세척의 일관성에 달려 있습니다.플레이트 세척의 올바른 작동은 ELISA 절차의 핵심입니다.
4) 일정한 온도에서의 배양을 위해 모든 시료와 시약은 빛 노출을 피해야 하며 각 마이크로플레이트는 커버 멤브레인으로 밀봉되어야 합니다.
6.2 작동 절차
1) 필요한 시약을 모두 꺼내 실온(20~25℃)에 30분 이상 두십시오.각 시약은 사용하기 전에 균일하게 혼합되도록 흔들어야 합니다.
2) 필요한 미세 웰 스트립과 플레이트 프레임을 가져옵니다.사용하지 않은 마이크로플레이트를 다시 밀봉하여 2-8℃에서 보관하고;
3) 용액 준비: 20X 농축 세척 완충액 40mL를 탈이온수로 1:19로 희석(20X 농축 세척 완충액 1부 + 탈이온수 19부)하거나 필요한 양만큼 준비합니다.
4) 번호 매기기: 샘플 및 표준 용액에 따라 미세 웰에 번호를 매깁니다.각 샘플 및 표준 용액은 중복으로 수행해야 합니다.위치를 기록합니다.
5) 항체작동액과 효소복합체 농축액 혼합액 준비 : 항체작동액과 효소복합체 농축액을 10:1로 균일하게 혼합한다. 보관시 포장수량에 여유가 있으니 비율에 맞게 준비해 주세요.)
6) 샘플 또는 표준용액을 20 µL씩 나누어 중복 well에 넣고 각 well에 Antibody working solution과 Concentrated Enzyme conjugate의 혼합액을 70 µL씩 넣는다.부드럽게 흔들어 혼합하고 커버 멤브레인으로 마이크로플레이트를 밀봉하고 25℃의 어두운 곳에서 30분 동안 배양합니다.
7) microplate를 250 µL/well의 세척 버퍼로 4~5회 세척합니다.15-30초 동안 세척 완충액으로 우물을 적시고 흡수지로 가볍게 두드려 건조시킵니다(날개를 펼친 후 기포가 있으면 깨끗한 팁으로 잘라냅니다).
8) 착색: 기질 A 용액 50 μL와 B 용액 50 μL를 각 웰에 첨가한다.부드럽게 흔들어 혼합하고 착색을 위해 어두운 곳에서 25℃에서 15분 동안 배양합니다.
9) 결정: 50 µL 정지 용액을 각 웰에 추가합니다.부드럽게 흔들어 섞는다.마이크로플레이트 판독기의 파장을 450nm로 설정하여 OD 값을 결정합니다.(dual-wavelength 450/630 nm에서 5분 이내에 OD 값을 읽을 것을 권장) .
7. 결과 판정
결과를 판단하는 방법에는 두 가지가 있습니다.첫 번째는 대략적인 판단이고 두 번째는 정량적 판단입니다.샘플의 OD 값은 MQCA의 내용과 음의 상관관계를 가집니다.
7.1 정성적 결정
농도 범위(ng/mL)는 시료의 평균 OD 값과 표준 용액의 평균 OD 값을 비교하여 얻을 수 있습니다.시료 Ⅰ의 OD 값을 0.3, 시료 Ⅱ의 OD 값을 1.0으로 가정하고 표준액의 OD값은 0ppb일 때 2.043, 0.5ppb일 때 1.716, 1.5ppb일 때 1.215, 4.5일 때 0.74이다. ppb, 13.5ppb는 0.313, 40.5ppb는 0.155이므로 시료Ⅰ의 농도범위는 13.5~40.5ppb, 시료Ⅱ의 농도범위는 1.5~4.5ppb이다.
7.2 정량적 결정
흡광도 값의 평균값은 시료와 표준액의 평균 OD 값(B)을 첫 번째 표준액(0 standard)의 OD 값(B0)으로 나눈 후 100%를 곱한 백분율과 같습니다. , 그건,
흡광도 값의 백분율 = | 비 | ×100% |
B0 |
B - 샘플 또는 표준 용액의 평균(이중 웰) OD 값
B0 - 0ng/mL 표준 용액의 평균 OD 값
표준용액의 흡수율과 MQCA 표준용액의 반로그값(ng/mL)을 각각 Y축과 X축으로 하여 표준곡선을 그린다.흡수율을 표준 곡선에 통합하여 표준 곡선에서 샘플의 해당 농도를 읽습니다.결과 값에 해당 희석 배를 곱하여 최종적으로 샘플의 MQCA 농도를 얻습니다.
이 키트의 전문 분석 소프트웨어를 사용하면 많은 양의 샘플을 정확하고 신속하게 분석할 수 있습니다.(이 소프트웨어에 대해서는 당사에 문의하십시오)
8. 주의사항
1. 실온이 25℃ 미만이거나 시약 및 시료의 온도가 실온(20-25℃)으로 되돌려지지 않으면 표준 OD 값이 낮아집니다.
2. 세척 과정에서 마이크로플레이트의 건조는 비선형 표준 곡선 및 바람직하지 않은 재현성을 포함하는 상황을 동반합니다.
3. 모든 시약과 반응 혼합물을 균일하게 혼합하고 마이크로플레이트를 철저히 세척합니다. 그렇지 않으면 바람직하지 않은 재현성이 있습니다.
4. 정지 용액은 2M 황산 용액이며 피부에 닿지 않도록 하십시오.
5. 사용하지 않은 마이크로플레이트를 자동 밀봉 백에 넣어 다시 밀봉합니다.표준물질과 무색발색제는 빛에 민감하여 빛에 직접 노출되지 않는다.
6. 사용기한이 지난 키트는 사용하지 마세요.키트에서 희석되거나 불순물이 섞인 시약을 사용하면 감도와 감지 OD 값이 변경됩니다.다른 로트 번호의 키트에서 시약을 교환하여 사용하지 마십시오.
7. 이 용액의 퇴화를 나타내는 색상이 있는 착색 용액을 폐기하십시오.0.5 미만의 0 표준 용액의 검출 값은 변성을 나타냅니다.
8. 최적의 반응온도는 25℃이며, 온도가 너무 높거나 낮으면 검출감도와 OD 값이 변하게 됩니다.
9. 보관 및 사용기한
보관: 2-8℃에서 보관, 냉동하지 않음.
만료 날짜: 12개월;생산 날짜는 상자에 있습니다.
참고: 마이크로플레이트의 진공 패키지에 누출이 있는 경우 여전히 사용할 수 있습니다. 테스트 결과에 영향을 주지 말고 편안하게 사용하십시오.
Q1. 언제 배송되나요?
A1: 우리는 당신을 위한 상품을 지불을 받기 후에 7 작업 일 안에 가능한 빨리 발송할 것입니다.(전염병 등 외부 요인의 경우 배송이 지연될 수 있습니다.)
Q2: OEM/ODM을 지원합니까?
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