닭 돼지 오리 96 구멍 / 세트 민감도 0.2 PPB (단위)을 위한 아마타딘 증상을 나타내는 elisa 장비

닭 돼지 오리 96웰용 Amantadine ELISA 테스트 키트/키트 감도 0.2ppb

 

1. 원리

이 테스트 키트는 Amantadine 검출을 위한 경쟁적 효소 면역분석법을 기반으로 합니다.커플 링 항원은 마이크로 웰 스트라이프에 미리 코팅되어 있습니다.샘플의 아만타딘과 마이크로웰 스트라이프에 미리 코팅된 커플링 항원은 항 아만타딘 항체를 놓고 경쟁합니다.효소접합체 첨가 후 TMB 기질을 첨가하여 착색한다.샘플의 광학 밀도(OD) 값은 샘플의 아만타딘과 음의 상관관계를 가집니다.이 값을 표준 곡선과 비교한 후 Amantadine 잔류물을 얻습니다.

 

2. 기술 사양

감도: 0.2ppb
인큐베이터 온도: 25℃
인큐베이터 시간: 30분~15분

탐지 한계:
닭, 오리 0.2ppb

교차 반응률:
아만타딘 100%

회수율:
닭, 오리 90±25%

 

3. 구성품

 

1	미세 웰 스트립	각각 8개의 제거 가능한 웰이 있는 12개의 스트립
2	6× 표준 용액(각각 1mL)	0ppb	0.2ppb
		0.8ppb	3.2ppb
		12.8ppb	51.2ppb
삼	효소접합체	7ml	빨간 모자
4	항체 작업 솔루션	7ml	파란색 모자
5	기판 A	7ml	하얀 모자
6	기판B	7ml	검은 모자
7	솔루션 중지	7ml	노란 모자
8	추출제	50ml*2	투명 캡
9	20배 농축 세척 버퍼	15ml	하얀 모자
10	5배 농축 재용해액	10ml	하얀 모자

 

4. 필요하지만 제공되지 않는 자료

 

1) 장비: ELISA Reader(450nm/630nm), 균질기, 진탕기, 원심분리기, 저울: 0.01g 정량감응형, 질소건조기, 인큐베이터, 눈금이 있는 피펫, 프린터

2) 마이크로피펫: 단일 채널 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, 다중 채널 30～300 μl

3) 시약: 아세토니트릴, n-헥산.

 

5. 샘플 전처리

 

주의 사항(전처리 전에 다음 사항을 처리해야 함)

1) 실험에는 일회용 팁만 사용할 수 있으며 다른 시약을 흡수하는 경우에는 팁을 교체해야 합니다.

2) 실험 전 각 실험기구는 깨끗이 세척하여야 하며, 실험결과에 지장을 주는 오염을 방지하기 위하여 필요시 재 세척하여야 한다.

 

시료 전처리 전 용액 준비:

1) 시료추출액

아세토니트릴 6부 + 추출제 1부로 바로 사용할 수 있는 시료 추출 용액을 얻습니다.

2) 검체용해액

농축된 재용해 용액(5X) 1부를 사용하고 탈이온수 4부로 용해하여 바로 사용할 수 있는 샘플 재용해 용액을 얻습니다.

샘플 준비

 

5.1 닭, 오리 시료 준비

1) 균질화된 조직 샘플 3.0±0.05g을 50ml 원심분리기 튜브에 넣습니다.6ml 샘플 추출 용액을 첨가하고, 3분 동안 진탕하고, 5분 동안 실온(20 - 25℃)에서 4000r/min 이상에서 원심분리기;

2) 맑은 유기상 2ml를 건조 용기에 넣고 50~60℃에서 질소 또는 공기로 건조시킵니다.

3) 먼저 n-헥산 1ml를 첨가한 다음, 샘플 재용해 용액 0.5ml를 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 실온(20 - 25℃)에서 4000r/min 이상에서 5분 동안 원심분리하고, 상층 n-헥산을 버린다;

4) 하층액 50μl를 취하여 시험한다.

희석 배율:0.5

 

6. ELISA 절차

 

6.1지침

1. 사용하기 전에 ELISA 시약을 실온(20 - 25 °C)에 두십시오.

2. ELISA 시약은 사용 후 즉시 2-8℃로 되돌려 놓습니다.

3. 분석 과정에서 ELISA 재현성은 세척판의 일관성에 크게 좌우되며, 올바른 세척판 작동이 ELISA 프로그램의 판단 기준입니다.

4. 항온 배양의 모든 과정에서 빛 노출을 피하고 커버 멤브레인으로 마이크로 플레이트를 밀봉하십시오.

 

6. 2 작업 절차

1. 테스트 키트를 실온(20-25℃)에 최소 30분 동안 두십시오. 각 시약은 사용하기 전에 균일하게 흔들어야 합니다.

2. 필요한 마이크로 웰 스트립을 플레이트 프레임에 넣습니다.사용하지 않은 마이크로플레이트를 다시 밀봉하여 2-8℃에서 냉동 보관하지 않음.

3. 용액 준비: 탈이온수로 15ml 20x 농축 세척 완충액을 300ml로 희석합니다.

4. 번호 매기기: 샘플 및 표준 용액에 따라 마이크로 웰에 번호를 매깁니다.각 샘플 및 표준 용액은 중복으로 수행해야 합니다.그들의 위치를 ​​기록합니다.

5. 표준/샘플 추가: 샘플 또는 표준 용액 50µL를 별도의 이중 웰에 추가한 다음 효소 접합체(50µL/웰)를 추가합니다.그런 다음 항체 작업 용액, 50 μL/웰.플레이트를 수동으로 흔들어 부드럽게 섞고 커버 멤브레인으로 마이크로플레이트를 밀봉하고 어둠 속에서 30분 동안 25°C에서 배양합니다.

6. 마이크로플레이트 세척: 커버 멤브레인을 조심스럽게 열고 마이크로웰에서 액체를 부으십시오.250 µL/well의 희석된 washing buffer를 넣고 15-30초씩 4-5회 충분히 씻은 후 꺼내서 흡수지로 가볍게 두드려 말립니다.

7. 착색: 기판 A 용액 50µL를 추가한 다음 각 웰에 B 용액 50µL를 추가합니다.플레이트를 수동으로 흔들어 부드럽게 혼합하고 착색을 위해 어두운 곳에서 15분 동안 25°C에서 배양합니다.

8. 측정: 정지 용액 50µL를 각 웰에 추가합니다.플레이트를 수동으로 흔들어 부드럽게 섞습니다.마이크로플레이트 리더의 파장을 450nm로 설정하여 모든 웰의 OD 값을 결정합니다.(5분 이내에 이중 파장 450/630nm에서 OD 값을 읽는 것이 좋습니다).

 

7. 결과 판정

결과를 판단하는 방법에는 두 가지가 있습니다.첫 번째는 대략적인 판단이고 두 번째는 정량적 판단입니다.샘플의 OD 값은 샘플의 Amantadine과 음의 상관 관계가 있음에 유의하십시오.

7.1 정성적 결정
농도 범위(ng/ml)는 평균 흡광도 값을 표준과 비교하여 얻을 수 있습니다.샘플 1의 흡광도 값이 0.3이고 샘플 2가 1.0이고 표준이 0ppb/2.243이라고 가정합니다.2.054의 0.2ppb;1.715의 0.8ppb;1.074의 3.2ppb;0.451의 12.8ppb;0.155의 51.2ppb.그런 다음 샘플 1의 농도는 12.8ppb ~ 51.2ppb 범위입니다.샘플 2는 3.2ppb ~ 12.8ppb입니다.샘플 내 아만타딘의 농도 범위는 샘플의 해당 희석을 곱하여 얻을 수 있습니다.
 

7. 2 정량분석
시료의 농도를 계산하기 위해서는 표준 곡선을 만들어야 합니다.표준 곡선을 만들기 전에 % 흡광도의 개념을 알아야 합니다.
% 흡광도 계산:

 

흡광도 값의 백분율 =	비	×100%
	B0

 

B - 샘플 또는 표준 용액의 평균 OD 값
B0 - 0ng/mL 표준 용액의 평균 OD 값
따라서 영점 표준은 100%가 되고 흡광도 값은 백분율로 표시됩니다.표준에 대해 계산된 값은 아만타딘 농도[ng/mL]에 대한 반로그 그래프 용지의 좌표 시스템에 입력됩니다.각 샘플의 흡광도에 해당하는 ng/mL(ppb) 단위의 Amantadine 농도는 검량선에서 읽을 수 있습니다.
ELISA의 결과 분석을 위한 특수 소프트웨어는 이중 또는 다중 측정을 용이하게 합니다.필요하신 분은 전화문의 부탁드립니다.

 

8. 주의사항

 

1. 실온이 25℃ 이하이거나 시약의 온도와 시료가 실온(20~25℃)으로 돌아오지 않으면 표준 OD 값이 낮아집니다.
2. 세척 과정에서 마이크로플레이트가 건조되어 표준 곡선의 비선형성과 재현성이 떨어집니다.따라서 세척 후 바로 다음 단계로 진행하십시오.
3. 시약을 추가하기 전에 잘 섞습니다.
4. 정지용액은 2M 황산용액으로 피부에 닿지 않도록 한다.
5. 사용기한이 지난 키트는 사용하지 마세요.키트에서 희석되거나 오염된 시약을 사용하면 감도 및 검출 OD 값이 변경될 수 있습니다.키트의 다른 배치에서 시약을 교체하지 마십시오.
6. 보관: 2-8°C에서 보관하고 동결하지 마십시오.사용하지 않은 마이크로플레이트는 자체 밀봉 백에 다시 밀봉합니다.표준물질과 무색 커플러는 빛에 민감하여 빛에 직접 노출될 수 없습니다.
7. 색이 변질되었음을 나타내는 착색 용액은 모두 폐기하십시오.0 표준용액(0ppb)의 검출값(450/630nm)은 변성을 나타내는 0.5 미만((A450nm<0.5))입니다.
8. 최적의 반응온도는 25℃이다.온도가 너무 높거나 낮으면 감지 감도와 OD 값이 변경됩니다.

 

9. 보관 및 사용기한

보관: 2-8℃에서 보관, 냉동하지 않음.
만료 날짜: 12개월;생산 날짜는 상자에 있습니다.
참고: 마이크로플레이트의 진공 패키지에 누출이 있는 경우 여전히 사용할 수 있습니다. 테스트 결과에 영향을 주지 말고 편안하게 사용하십시오.

 

 

 

 

 

Q1. 언제 배송되나요?
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