우유 식품 안전성 민감도 96Wells/Kit을 위한 새우류 니트로푸란 아모스 0.03ppb 증상을 나타내는 elisa 장비

우유 감도 0.03ppb 96Wells/Kit를 위한 Nitrofuran AMOZ 진단 ELISA 장비

 

1.진단 ELISA 키트원칙

이 검출 키트는 샘플에서 AMOZ를 검출하기 위한 경쟁적 효소 면역 분석법을 기반으로 합니다.접합된 항원은 마이크로웰 스트립에 미리 코팅되어 있습니다.샘플의 AMOZ는 항-AMOZ 항체를 위해 마이크로웰 스트립에 미리 코팅된 접합 항원과 경쟁합니다.효소 컨쥬게이트를 첨가한 후 염색을 위해 TMB 기질을 첨가한다.샘플의 광학 밀도(OD) 값은 샘플의 AMOZ와 음의 상관관계가 있습니다.이 값은 표준 곡선과 비교되며 이후에 AMOZ 농도를 얻습니다.

 

2. 기술 사양

 

감도: 0.03ppb

인큐베이션 온도: 25℃

인큐베이션 시간: 30분~15분

검출한계 조직, 달걀, 꿀: 0.1ppb

교차 반응률

아모즈 100%

AHD < 0.1%

아오즈 < 0.1%

SEM < 0.1%

회수율

조직 80 ± 25%

꿀 75 ± 25%

계란 95 ± 25%

 

삼.Nitrofuran AMOZ ELISA 식품 안전 테스트 키트구성품

 

1	미세 웰 스트립	제거 가능한 8개의 스트립이 있는 12개의 스트립 각각의 우물
2	6× 표준 용액(각각 1mL)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
삼	효소접합체	7ml	빨간 모자
4	항체 작업 솔루션	7ml	파란색 모자
5	기판 A	7ml	하얀 모자
6	기판B	7ml	검은 모자
7	솔루션 중지	7ml	노란 모자
8	20배 농축 세척 버퍼	40ml	하얀 모자
9	2× 농축 재용해 용액	50ml	투명 캡
10	2-니트로벤즈알데히드(C7H5NO3)	2-니트로벤즈알데히드(C7H5NO3)	2-니트로벤즈알데히드(C7H5NO3)

 

 

4. 필요하지만 제공되지 않는 자료
1) 장비: 마이크로플레이트 판독기, 프린터, 균질화기, 질소 건조기, 볼텍서, 원심분리기, 측정 튜브, 저울(0.01g 역수), 인큐베이터, 수조;
2) 마이크로피펫: 단일 채널 20-200µL, 100-1000µL, 다중 채널 30-300µl;
3) 시약: NaOH, 에틸 아세테이트, n-헥산, HCl(약 36.5%), K2HPO4·3H2O

5. 샘플 준비

지시하다
모든 종류의 샘플 전처리 전에 다음 사항을 해결해야 합니다.
1) 실험은 일회용 팁만 사용할 수 있으며 다른 시약 흡입 시 팁을 교체해야 합니다.
2) 실험 전 각 실험장비는 실험결과에 영향을 미치는 오염을 피하기 위해 필요시 세척 및 재세척을 하여야 한다.

시료 전처리 전 용액 준비:
1) 0.1M K2HPO4: K2HPO4·3H2O 11.4g을 탈이온수에 녹여 500mL로 만든다.
2) 1M HCl: 8.6mL의 HCl(약 36.5%)을 탈이온수에 용해하여 100mL로 만든다.
3) 1M NaOH: NaOH 4g을 탈이온수에 녹여 100mL로 만든다.
4) 시료 재용해를 위해 2× 농축 재용해 용액을 탈이온수와 1:1로 희석합니다(농축 재용해 용액 1mL + 탈이온수 1mL).

 

5.1 샘플 준비

ㅏ)조직, 달걀
1) 균질 시료 1±0.05g을 달아 증류수 4mL, 1M HCl 0.5mL, 2-니트로벤즈알데히드(C7H5NO3) 100μL를 각각의 튜브에 넣고 2분 동안 적절히 흔든다.
2) 37°C에서 밤새(약 16시간) 또는 56°C의 수조에서(2시간) 배양합니다.
3) 각 튜브에 0.1M K2HPO4 5mL, 1M NaOH 0.4mL, 에틸아세테이트 6mL를 넣고 30초 동안 흔든다.
4) 실온(20-25°C)에서 4000r/min 이상에서 10분간 원심분리(유화가 있거나 에틸아세테이트 층이 3ml 미만인 경우 시료를 80°C 수조에서 10분간 배양한 후 원심분리) 반복하거나 속도를 높이고 원심분리 시간을 연장하십시오).
5) 3 mL 에틸아세테이트 층을 새로운 원심분리기 튜브로 옮기고 50°C에서 질소 또는 공기로 증발 건조시킨다.
6) 건조된 잔류물을 n-헥산 2 mL에 녹이고 희석한 재구성액 1 mL를 넣어 30초 동안 잘 섞은 후 실온(20-25°C)에서 4000 rpm 이상의 속도로 10분간 원심분리한다. 분;상부 n-헥산 상을 제거합니다.(유화가 발생하면 상부 n-헥산 상을 제거하고 샘플을 70°C 수조에서 10-20분 동안 배양하고 원심분리를 반복합니다).
7) 분석을 위해 하층의 50 µL를 취한다.
샘플 희석 계수: 2

b) 여보
1) 균질 시료(꿀) 2±0.05g의 무게를 측정하고 증류수 4mL, 1M HCl 0.5mL, 2-니트로벤즈알데히드(C7H5NO3) 100μL를 각 튜브에 넣고 2분 동안 적절하게 흔듭니다.
2) 37°C에서 밤새(약 16시간) 또는 56°C의 수조에서(2시간) 배양합니다.
3) 각 튜브에 0.1M K2HPO4 5mL, 1M NaOH 0.4mL, 에틸아세테이트 6mL를 넣고 30초 동안 흔든다.
4) 실온(20-25°C)에서 4000r/min 이상에서 10분간 원심분리(유화가 있거나 에틸아세테이트 층이 3ml 미만인 경우 시료를 80°C 수조에서 10분간 반복 원심분리하거나, 속도를 높이고 원심 분리 시간을 연장하십시오).
5) 3 mL 에틸아세테이트 층을 새로운 원심분리기 튜브로 옮기고 50°C에서 질소 또는 공기로 증발 건조시킨다.
6) 건조된 잔류물을 n-헥산 2 mL에 녹이고 묽은 재구성액 1 mL를 넣어 30초간 잘 섞은 후 실온(20-25°C)에서 4000 r/min 이상의 속도로 원심분리하여 10 분;상부 n-헥산 상을 제거합니다.(유화가 발생하면 상부 n-헥산 상을 제거하고 샘플을 70°C 수조에서 10-20분 동안 배양하고 원심분리를 반복합니다).
7) 분석을 위해 하층의 50 µL를 취한다.
샘플 희석 계수: 1

 

 

6. ELISA 절차

6.1 설명
1) 사용하기 전에 모든 시약과 마이크로웰 스트립을 실온(20-25°C)에 두십시오.
2) 사용 직후 모든 시약을 2-8°C로 되돌립니다.
3) ELISA 분석의 재현성은 플레이트 세척의 일관성에 크게 좌우됩니다.플레이트 세척의 올바른 작동은 ELISA 절차의 핵심입니다.
4) 항온 배양 동안 모든 시료와 시약은 빛으로부터 보호되어야 하며 각 마이크로플레이트는 커버 필름으로 밀봉되어야 합니다.

6.2 작동 절차
1) 키트를 상온(20-25°C)에 30분 이상 두십시오. 각 시약은 사용하기 전에 잘 흔들고 혼합해야 하며 필요한 마이크로웰 스트립을 플레이트 프레임에 넣습니다.사용하지 않은 마이크로플레이트는 다시 밀봉하여 2-8°C에서 보관해야 하며 냉동하지 않아야 합니다.
2) 용액 준비: 탈이온수로 1:19로 희석된 20× 농축 세척 완충액 40mL(20× 농축 세척 완충액 1부 + 탈이온수 19부).또는 필요에 따라 준비하십시오.
3) 번호 매기기: 샘플 및 표준 용액에 따라 마이크로웰에 번호를 매깁니다.각각의 검체와 표준용액은 2부씩 만들어 그 위치를 기록한다.
4) 별도의 복제 웰에 50µL의 샘플 또는 표준 용액을 추가합니다.각 well에 50ul의 enzyme conjugate를 넣고 50µL의 antibody working solution을 넣고 손으로 흔들어 잘 섞이도록 합니다.커버 필름으로 마이크로플레이트를 밀봉하고 25°C에서 30분 동안 배양합니다.
5) 마이크로웰에 액체를 붓고 흡수지로 가볍게 두드려 건조시킨 후 250 μL/웰의 세척 버퍼를 추가하여 마이크로웰 플레이트를 15-30초 동안 세척한 다음 제거하고 흡수지로 두드려 건조시키는 과정을 4-5회 반복합니다.(두드린 후 기포가 있으면 깨끗한 팁으로 잘라냅니다.)
6) 발색: 기질 A 50 μL를 각 웰에 첨가한 다음 기질 B 50 μL를 첨가합니다. 플레이트를 손으로 흔들어 부드럽게 섞은 다음 어두운 곳에서 25 °C에서 15분 동안 발색하여 발색합니다.
7) 분석: 각 웰에 정지 용액 50μL를 첨가합니다.손으로 접시를 흔들어 부드럽게 섞는다.마이크로플레이트 리더의 파장을 450nm로 설정하여 각 웰의 OD 값을 결정합니다.(5분 이내에 이중 파장 450/630nm에서 OD 값을 읽는 것이 좋습니다).

 

7. 결과 판정

 

결과를 판단하는 방법에는 두 가지가 있습니다. 첫 번째는 대략적인 판단이고 두 번째는 정량적 판단입니다.샘플의 OD 값은 AMOZ 농도와 음의 상관관계가 있음에 유의하십시오.

7.1 정성적 결정

AMOZ의 농도 범위(ng/mL)는 시료와 표준용액의 평균 OD 값을 비교하여 구할 수 있다.sampleⅠ의 OD값을 0.3, sampleⅡ의 OD값을 1.0으로 가정하면 표준용액의 OD값은 0ppb일 때 2.243, 0.03ppb일 때 1.816, 0.09ppb일 때 1.415, 0.27ppb일 때 0.74, 0.81ppb일 때 0.313이다. , 2.43ppb에 대해 0.155이므로 시료Ⅰ의 농도범위는 0.81~2.43ppb, 시료Ⅱ의 농도범위는 0.09~0.27ppb이다.

7.2 정량적 결정

흡광도 값의 평균값은 검체와 표준액의 평균 OD 값(B)을 첫 번째 표준액(0 standard)의 OD 값(B0)으로 나눈 후 100%를 곱한 값, 즉 ,

흡광도 값의 백분율 =	비	×100%
	B0

B - 샘플 또는 표준 용액의 평균 OD 값

B0 - 0ng/mL 표준 용액의 평균 OD 값

표준용액의 흡수율과 AMOZ표준용액의 반로그값(ng/mL)을 각각 Y축과 X축으로 하여 표준곡선을 그린다.흡수율을 표준 곡선에 통합하여 표준 곡선에서 샘플의 해당 농도를 읽습니다.그 결과 값에 상응하는 희석 배수를 곱하여 최종적으로 샘플의 AMOZ 농도를 얻습니다.

 

8. 주의사항
1) 실내 온도가 25℃보다 낮거나 시약 온도와 시료가 실온(20-25℃)으로 돌아오지 않아 표준 OD 값이 감소합니다.
2) 세척 과정에서 마이크로플레이트의 건조는 표준 곡선의 비선형성과 만족스럽지 못한 재현성을 동반합니다.따라서 세척 후 바로 다음 단계로 진행하십시오.
3) 잘 섞지 않으면 재현성이 떨어집니다.
4) 정지용액은 2M 황산용액으로 피부에 닿지 않도록 한다.
5) 사용기한이 지난 키트는 사용하지 마십시오.키트에서 희석되거나 오염된 시약을 사용하면 감도 및 검출 OD 값이 변경될 수 있습니다.키트의 다른 배치에서 시약을 교체하지 마십시오.
6) 사용하지 않은 마이크로플레이트는 자체 밀봉 백에 다시 밀봉합니다.표준 용액과 무색 커플러는 빛에 민감하며 빛에 직접 노출될 수 없습니다.
7) 색이 변질되었음을 나타내는 착색 용액은 모두 폐기하십시오.표준 용액 1(0ppb)에 대한 검출 값이 0.5 미만이면 열화를 나타냅니다.
8) 최적의 반응온도는 25℃이며 온도가 너무 높거나 낮으면 검출감도와 OD값이 변한다.
 

9. 보관 및 유효기간
보관: 2-8°C에서 보관하고 동결하지 마십시오.
만료 날짜: 12개월;생산 날짜는 상자에 있습니다.
참고: 마이크로플레이트 진공 포장이 새더라도 테스트 결과에 영향을 미치지 않고 계속 사용할 수 있으므로 안심하고 사용할 수 있습니다.

 

 

Q1. 언제 배송되나요?
A1: 우리는 당신을 위한 상품을 지불을 받기 후에 7 작업 일 안에 가능한 빨리 발송할 것입니다.(전염병 등 외부 요인의 경우 배송이 지연될 수 있습니다.)

 

Q2: OEM/ODM을 지원합니까?
A2: 지원 가능하지만 특정 수량은 100,000개 이상이어야 맞춤형 제품에 편리합니다.

 

Q3: 품질 관리 측면에서 귀사의 공장은 어떻습니까?
A3: 우리는 국가적으로 ISO9001 및 ISO13485 인증을 받았습니다.당사의 생산 공정은 표준 절차를 준수하여 최적의 제품 품질을 보장합니다.

 

Q4: 판매 후 서비스를 제공하는 방법?
A4: 전문적인 온라인 기술 애프터 서비스를 제공합니다.화상, 전화 등을 통한 1:1 안내가 가능합니다.

 

Q5: 지불 방법은 무엇입니까?
A5: 우리는 T/T로 지불을 받습니다.

 

Q6: 배송 방법?
A6: 당사의 많은 협력 운송업체로부터 견적을 받아 귀하에게 가장 적합한 배송 방법을 선택하고 귀하의 요구 사항에 따라 배송하십시오.