사료 옥수수 96 구멍 / 장비를 위한 장비를 시험하는 0.1ppb 제랄레논 마이코톡신

사료 옥수수 96 구멍 / 장비 민감도 0.1 PPB (단위)을 위한 제랄레논 ELISA 시험 키트

 

1. 원리

이 시험 키트는 제랄레논의 탐지를 위한 경쟁적 효소 면역 분석법을 기반으로 합니다. 결합 항원은 마이그로 웰 종류에 사전 코팅합니다. 마이그로 웰에 사전 코팅한 항원이 스트라이핑하는 샘플과 결합에서 제랄레논은 반대 제랄레논 항체와 경쟁합니다. 효소 접합체의 추가 뒤에, TMB 기질은 채색에 추가됩니다. 샘플의 사진 농도 (OD) 가치는 샘플에서 제랄레논으로 네가티브 상관을 가지고 있습니다. 이 가치는 표준 곡선과 비교되고 제랄레논 잔여물이 다음에 획득됩니다.

2. 기술적 요구

민감도 : 0.1 PPB (단위)
인공 부화기 온도 : 25C
인큐베이터 시간 : 30min~15min

검출 한계 :
10ppb를 공급하세요
쌀, 옥수수, 땅콩 5ppb

교차-반 작용 비율 :
제랄레논 100%

회수율 :
사료, 쌀, 땅콩, 옥수수 100±30%

3. 성분

 

 

1	마이그로 웰 스트립	12는 각각 8 제거할 수 있는 웰로 벗깁니다
2	6× 표준 해결책 (각각 1 mL)	0 PPB (단위)	0.1 PPB (단위)
		0.3 PPB (단위)	0.9 PPB (단위)
		2.7 PPB (단위)	8.1 PPB (단위)
3	효소 접합체	7 밀리람베르트	레드 캡
4	항체 사용 가능 솔루션	7 밀리람베르트	블루캡
5	기판 A	7 밀리람베르트	하얀 모자
6	서브스트레이트비	7 밀리람베르트	검은 모자
7	정지 용액	7 밀리람베르트	노란 캡
8	20X 집중된 세척 버퍼	40 밀리람베르트	하얀 모자
9	2X 집중된 레디스솔비왕 솔루션	50 밀리람베르트	투명캡

 

4. 요구되지만 제공되지 않는 재료

1) 장비 : 엘리사 리더 (450 nm / 630nm), 균질기, 교반기, 원심분리기, 균형 : 0.01g 양 민감한, 질소 -드라이링 장치, 인큐베이터, 눈금을 매긴 피펫, 프린터
2) 마이크로피펫 : 단일 채널 20l ~ 200l, 100l ~ 1000l, 다채널 30~300 μl
3) 시약 : 메탄올, n-헥산.

5. 샘플 예비 처리

교육 (다음과 같은 핵심이 예비 처리 전에와 함께 처리되어야 합니다)
1) 단지 일회용 팁은 실험을 위해 사용될 수 있고 다른 시약을 흡수해서 사용될 때 팁이 바뀌어야 합니다 ;
2) 실험 전에, 각각 실험적 기구는 깨끗하고, 실험 결과를 방해하는 오염물을 회피하기 위해, 필요한 경우 재청소되어야 합니다.

샘플 예비 처리 전에 용액 사전 준비 :
솔루션 1 번 : 샘플 레디스솔비왕
2×concentrated 레디스솔비왕 해결책은 표본 레디스솔비왕을 위해 사용되는 1시 1분 (1part 집중된 레디스솔비왕 해결책 + 1 탈염수 부분)에 탈염수로 희석됩니다.
솔루션 2 번 : 샘플 추출 솔루션
샘플 추출 해결책을 사용할 준비가 된 것 획득하기 위한 탈염수의 메탄올 + 3 부분의 7개 부분.

샘플 준비
5.1 공급 표본을 준비
1) 1.0±0.05g 연마된 공급 표본을 50 밀리람베르트 원심 분리관으로 데려가, 5 밀리람베르트 샘플 추출 수용액이 덧붙입니다 ;
2) 완전히 3 분 (또는 5 분 위에 손으로 휘청거리 ) 동안 악수가 10 분 동안 20C에 4000r/min 이상에서 원심기로 분리합니다 ;
3) 50ul 표면에 뜨는 물질(윗계층)을 잡고 950ul 샘플 레디스솔비왕, 쉐이크를 추가합니다에게 고르게 ;
4) 시험을 받기 위해 50μl을 잡으세요
희석 비율 : 100
기록 : 만약 샘플에서 드러그 잔여물 집중이 곡선 범위의 밖에 있다면, 샘플이 더욱 (예를 들면 검사를 위해 희석될 수 있습니다 : 50ul 표면에 뜨는 물질(윗계층)을 새로운 원심 분리관으로 데려가고 1450ul 탈염수를 추가하시오 그러면 희석 비율은150 ) 입니다.

5.2Preparation의 옥수수, 쌀 표본
1) 1.0±0.05g 연마된 샘플을 50 밀리람베르트 원심 분리관으로 데려가세요 ; 5가지 밀리람베르트 샘플 추출 솔루션을 추가하세요 ;
2) 완전히 3 분 (또는 5 분 위에 손으로 휘청거리 ) 동안 악수가 10 분 동안 20C에 4000r/min 이상에서 원심기로 분리합니다 ;
3) 100ul 표면에 뜨는 물질(윗계층)을 잡고 900ul 샘플 레디스솔비왕, 쉐이크를 추가합니다에게 고르게 ;
4) 시험을 받기 위해 50μl을 잡으세요
희석 비율 : 50
기록 : 만약 샘플의 드러그 잔여물 집중이 곡선 범위의 밖에 있다면, 샘플이 더욱 (예를 들면 검사를 위해 희석될 수 있습니다 : 50ul 표면에 뜨는 물질(윗계층)을 새로운 원심 분리관으로 데려가고 950 탈염수를 추가하시오 그러면 희석 비율은 있습니다 100).

5.3Preparation의 땅콩 샘플
1) 1.0±0.05g 연마된 땅콩 샘플을 50 밀리람베르트 원심 분리관으로 데려가세요 ; 5개 밀리람베르트 샘플이 솔루션을 추출한다고 덧붙이고 4 밀리람베르트 n-헥산을 추가하세요 ;
2) 완전히 3 분 (또는 5 분 위에 손으로 휘청거리 ) 동안 악수가 10 분 동안 20C에 4000r/min 이상에서 원심기로 분리합니다 ;
3) 포기 윗계층 맑은 액체가 100ul 중간층 액체를 잡고 900ul 샘플 레디스솔비왕, 쉐이크를 추가합니다에게 고르게 ;
4) 시험을 받기 위해 50μl을 잡으세요
희석 비율 : 50
기록 : 만약 샘플의 드러그 잔여물 집중이 곡선 범위의 밖에 있다면, 샘플이 더욱 (예를 들면 검사를 위해 희석될 수 있습니다 : 50ul 중간층 액체를 새로운 원심 분리관으로 데려가고 950 탈염수를 추가하시오 그러면 희석 비율은100) 입니다.

 

6. ELISA 절차

6.1 교육
1. 사용 전에 ELISA 시약을 실온 (20일부터 25일까지 'Ｃ에) 가져오세요.
2. 사용 뒤에 바로 2-8 Ｃ로 되돌아가는 ELISA 시약을 두세요
3. 분석 프로세스에서 ELISA 재현성은 주로 있고 세척 플레이트, 정확한 세척 플레이트 작전의 일관성이 결정 ELISA 프로그램의 시점인지에 달려있습니다
4. 일정온도 인큐베이션의 모든 과정에서 빛 노출을 피하고 마이크로플레이트를 덮개 막으로 밀봉하세요.

6.2 작업 과정

1. 적어도 30의 분을 위한 실온 (20-25' Ｃ)에 있는 장비를 두고 각각 시약이 사용 전에 잘 흔들릴 것이라는 것에 주목하세요 ;
2. 바람직한 마이크로웰 스트립을 플레이트 프레임에 위치시키세요. 언유스드는 미소플레이팅하고 재봉해지고 동결되지 않는 2-8' Ｃ에 저장하여야 합니다.
3. 용액 사전 준비 : 20× 집중된 세척 버퍼의 40 밀리람베르트를 잡고 1시 19분 (탈염수의 20× 집중된 세척 버퍼 + 19 부분의 1개 부분)의 비율에 그것을 탈염수에 녹이거나, 필요에 따라 준비합니다.
4. 달하는 것 : 표본과 표준 해결책에 따른 마이크로웰 수 ; 각각 표본과 표준 해결책은 정부 2통으로 행해져야 합니다 ; 그들의 위치들을 기록하세요.
5. 표준 / 표본을 추가하세요 : 이중 우물을 분리하기 위해 표본 또는 표준 해결책의 50 uL을 추가하고 잘 효소 접합체, 50 uL /를 추가하세요 ; 그리고 나서 항체 사용 가능 솔루션, 50 uL/well. 손으로 플레이트를 흔들음으로써 점잖게 혼합되고, 마이크로플레이트를 커버 필름으로 밀봉하고, 어둠 속에서 25에 30 분 동안 'Ｃ를 배양하세요.
6. 마이크로플레이트를 씻으세요 : 주의깊게 커버 필름을 열고 마이크로웰에서 액체를 털어놓으세요 ; 250 uL/well의 세척 버퍼를 추가하고 Ｓ 매 시각 15-30을 위해 4-5 배 완전히 씻고 흡수지 적절한 건식으로 그것을 제거하세요. (마르는 후 사용하지 않은 창으로 기포를 찌르세요)
7. 색상 개발 : 솔루션 비의 50 uL을 뒤이어 각각 웰의 솔루션 기판의 50 uL을 추가하세요. 손으로 플레이트를 흔들음으로써 점잖게 혼합되고 염색을 위해 어둠 속에서 25 'Ｃ에 15 분 동안 잠복하세요.
8. 화나게 하세요 : 정지 용액의 50 uL을 추가합니다에게 각각 잘. 손으로 플레이트를 흔들음으로써 점잖게 혼합되세요. OD 가치를 결정하기 위해 450 nm에 대한 미소 평판 해독기의 사고 방식에서 설정합니다의 각각 잘. (그것은 이중 파장에 있는 OD 가치로 5 분 이내에 450/630 nm을 읽어준다고 추천받습니다).

 

7. 결과 심판

결과를 판단하기 위한 2가지 방법이 있습니다 ; 첫번째 것이 거친 판단인 반면에, 초는 정량적 결정입니다. 샘플의 OD 가치가 샘플에서 제랄레논으로 네가티브 상관을 가지고 있다는 것에 주목하세요
7.1 정성 측정
농도 범위 (PPB (단위))는 지나서 획득될 수 있고 평균 흡광도값을 기준과 비교했습니다. 표본의 흡 광도 값이 1는 0.3 인 것으로 가정하시오 그러면 표본은 2는 1.0 이고 기준이 다음과 같습니다 : 2.243 중 0ppb ; 1.816 중 0.1ppb ; 1.415 중 0.3ppb ; 0.74 중 0.9ppb ; 0.313 중 2.7ppb ; 0.155 중 8.1ppb. 그리고 나서 하나가 2.7ppb ~ 8.1ppb의 더 레인지에 있는 샘플의 집중 ; 샘플 2는 0.3ppb ~ 0.9ppb입니다. 샘플에서 제랄레논의 농도 범위는 샘플의 상응하는 희석에 의해 증가하는 것으로에 의해 존재할 수 있습니다.
7. 2가지 정량 분석
샘플의 집중을 산정하기 위해, 표준 곡선은 만들어져야 합니다. 표준 곡선이 만들어지기 전에 % 흡광도의 개념은 있어야 하고 압니다.
% 흡광도의 계산 :

 

흡 광도 값의 비율 =	비	×100%
	B0

일반적인 샘플 또는 표준 해결책의 OD 가치 비
B0 일반적인 0 ng/mL 표준 해결책의 OD 가치
제로 기준은 그러므로 충분한 100 %를 만들어지고 흡 광도 값이 퍼센트에서 인용됩니다. 기준 동안 산정된 가치는 그 제랄레논 집중 [NG (좋지않다) / mL]에 반대하여 편대수 방안지에 좌표계에 입력됩니다. 각각 샘플의 흡광도에 해당한 NG (좋지않다) / 밀리람베르트에서 제랄레논 집중은 검정 곡선에서 읽혀질 수 있습니다.
ELISA의 결과 해석을 위한 특정 소프트웨어는 두배이거나 다중 측정을 용이하게 할 것입니다. 당신이 미안하지만, 필요하면 요구에게 전화하세요.

8. 예방책

1. 25 Ｃ 아래에 있는 실온 또는 실온 (20-25 C)로 되돌아 가지 않는 시약과 표본의 온도는 더 낮은 규범 OD 가치로 이어질 것입니다.
2. 세척 프로세스에서 마이크로플레이트의 건조는 연결이 잘되지 않는 표준 곡선과 탐탐치 않은 재현성을 포함하는 상황을 동반할 것입니다 ; 그럼 씻은 후 바로 다음 단계에 계속되세요.
3. 어떠한 시약도 추가하기 전에 고르게 혼합되세요.
4. 정지 용액은 2가지 Ｍ 황산 용액이고 외피로 접촉을 피합니다.
5. 그것의 예정 만료일을 초과하는 장비를 사용하지 마세요. 장비로부터의 약해지거나 불순한 시약의 이용은 민감도와 감지 OD 가치의 변경으로 이어질 것입니다. 사용하기 위한 다양한 로트번호의 장비로부터 시약을 교환하지 마세요.
6. 저장 : 동결되지 않는 2-8 Ｃ에 저장하세요. 사용하지 않은 마이크로플레이트를 재-밀봉에 대한 오토-씰링 가방에 넣습니다 그것. 표준시료와 무색인 발색제는 광 감응이고 그러므로 그들이 빛을 직접적으로 향하고 있을 수 없습니다.
7. 이용액의 퇴행을 보여주는 어떠한 색과 착색 솔루션을 포기하세요. 0.5 ((A450nm<0> 8이하의 0가지 표준 해결책 (0 PPB (단위))의 감지 가치(450/630nm). 최적 반응 온도는 25 Ｃ이고 또한 높 또는 또한 저온이 감지 력과 OD 가치의 변화의 결과가 될 것입니다.

9. 저장과 예정 만료일

저장 : 동결되지 않는 2-8 Ｃ에 저장하세요.
예정 만료일 : 12개월 ; 생산의 날짜는 박스에 있습니다.
기록 : 만약 마이크로플레이트의 진공 패키지가 누출을 가지고 있다면, 사용하도록 여전히 유효하고 테스트 결과에 영향을 미치고 있지 않고 사용하기 위해 이완됩니다.

 

 

 

 

 

 

 

Q1 : 그럼 언제쯤 배송이 가능한가요?
A1 : 우리는 대금을 받은 후 7 근무일 이내에 최대한 빨리 당신을 위한 상품을 수송할 것입니다. (유행과 같은 외부 요인의 경우에, 배달은 연기될 수 있습니다)

 

Q2 : 그것은 OEM / ODM을 지원합니까?
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Q3 : 품질 관리의 관점에서 하는 당신의 공장은 어떻습니까?
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