우유 민감도 0.02ppb 96Wells/Kit을 위한 니트로푸란 SEM ELISA 식품 안전성 시험 키트

우유 민감도 0.02ppb 96Wells/Kit을 위한 니트로푸란 SEM ELISA 식품 안전성 시험 키트

 

1. 니트로푸란 SEM ELISA 식품 안전성 시험 키트 원칙

 

이 시험 키트는 샘플에 니트로푸란 (SEM)의 탐지를 위한 경쟁적 효소 면역 분석법을 기반으로 합니다. 결합 항원은 마이그로 웰 종류에 사전 코팅합니다. 마이그로 웰에 사전 코팅한 항원이 스트라이핑하는 샘플과 결합에서 니트로푸란 (SEM)는 안티-SEM 항체와 경쟁합니다. 효소 접합체의 추가 뒤에, TMB 기질은 채색에 추가됩니다. 샘플의 사진 농도 (OD) 가치는 그 안에서 SEM으로 네가티브 상관을 가지고 있습니다. 이 가치는 표준 곡선과 비교되고 SEM 집중이 다음에 획득됩니다.

 

2. 기술적 요구

 

민감도 : 0.02ppb

인큐베이션 온도 : 25C

인큐베이션 시간 : 30min~15min

검출 한계 조직, 달걀, 꿀 : 0.1ppb

교차-반 작용 비율

SEM 100%

아모스 < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

회수율

조직 75±25%

꿀 70±20%

달걀 95±25%

 

3. 니트로푸란 SEM ELISA 식품 안전성 시험 키트 성분

 

1	마이그로 웰 스트립	제거할 수 있는 8와 12 스트립 웰 각각
2	6× 표준 해결책 (각각 1 mL)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	효소 접합체	7 밀리람베르트	레드 캡
4	항체 사용 가능 솔루션	7 밀리람베르트	블루캡
5	기판 A	7 밀리람베르트	하얀 모자
6	서브스트레이트비	7 밀리람베르트	검은 모자
7	정지 용액	7 밀리람베르트	노란 캡
8	20× 집중된 세척 버퍼	40 밀리람베르트	하얀 모자
9	2× 집중된 레디스솔비왕 솔루션	50 밀리람베르트	투명캡
10	2-니트로벤즈알데히드 (C7H5NO3)	10 밀리람베르트	검은 모자

 

4. 요구되지만 제공되지 않는 재료

 

1) 장비 :미소 평판 해독기, 측정하는 프린터, 균질기, 질소 -드라이링 장치, 소용돌이, 원심분리기는 피펫으로 계량하고 0.01 Ｇ), 인큐베이터, 수조의 감량을 균형화시킵니다 ;

2) 마이크로피펫 : 단일 채널 20-200uL과 100-1000uL과 다채널 30~300ul ;

3) 시약 : 나오하, 아세트산 에틸, n-헥산, HCI (대략 36.5%), K2HPO4·3H2O.

 

5. 샘플 예비 처리

 

교육

다음과 같은 포인트는 어떠한 약간 표본의 예비 처리 전에 거래하여야 합니다 :

1) 단지 일회용 팁은 실험을 위해 사용될 수 있고 다른 시약을 흡수해서 사용될 때 팁이 바뀌어야 합니다 ;

2) 실험 전에, 각각 실험용 장치는 깨끗하고, 실험 결과를 방해하는 오염물을 회피하기 위해, 필요한 경우 재청소되어야 합니다.

샘플 예비 처리 전에 용액 사전 준비 :

1) 0.1 Ｍ K2HPO4 : 500mL에 11.4 Ｇ K2HPO4·3H2O를 탈염수에 녹이세요.

2) 1 Ｍ 하크들 : 100mL에 8.6mL HCI (대략 36.5%)를 탈염수에 녹이세요.

3) 1 Ｍ 나오하 : 100mL에 4g 나오하를 탈염수에 녹이세요.

4) 2×concentrated 레디스솔비왕 수용액은 표본 레디스솔비왕을 위해 사용되는 1시 1분 (1mL 집중된 레디스솔비왕 수용액 + 1mL 탈염수)에 탈염수로 희석됩니다.

 

5.1 샘플 준비

a) 조직, 달걀

1) 균질화 표본의 무게 1± 0.05g가 2 분 동안 적당히 증류수, 0.5mL 1 Ｍ HCI 중 4mL과 각각 튜브, 쉐이크에 대한 100uL 2-니트로벤즈알데히드 (C7H5NO3)를 추가합니다.;.

2) (approx16 시간) 아침까지 at37 Ｃ를 배양하거나 수조 (2 시간)까지 at56C를 배양하세요.

3) 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M 나오하와 6mL 아세트산 에틸을 30대를 위한 각각 튜브, 쉐이크에 더하세요.

4) 10 분 동안 실온 (20-25 C)에 있는 4000r/min 이상 원심분리기는 유화가 있거나 초산에틸층이 3 밀리람베르트에 대해 충분하지 않(면, 반복해서 10 분과 원심분리기 동안 80C 수조에 표본을 배양하세요 ; 또는 증가는 원심분리기의) 시간을 가속시키고 확장합니다.

5) 아세트산 에틸의 열전달 3mL은 새로운 원심 튜브 안으로 층을 이루고, 50C에 질소 또는 공기에 의해 건조로 증발합니다.

6) 건조 잔사를 2mL n-헥산에 녹이, 약해진 레디스솔비왕 솔루션 중 1mL, 적당히 30 초 동안 혼합, 10 분 동안 실온 (20-25 C)에 있는 4000개 Ｒ / 분 위에 원심분리기가 덧붙입니다 ; 윗계층 n-헥산 단계를 제거하세요 (윗계층 n-헥산 단계를 제거한 후의, 유화가 있다고 10-20min, 반복해서 원심분리기를 위한 70C 수조에 있는 표본이 잠복하면).

7) 분석을 위한 더 낮은 것의 50 uL을 잡으세요.

샘플의 희석의 폴드 : 2

b) 꿀

1) 균질화 표본 (꿀)의 무게 2± 0.05g가 2 분 동안 적당히 증류수, 0.5mL 1 Ｍ HCI 중 4mL과 각각 튜브, 쉐이크에 대한 100 uL 2-니트로벤즈알데히드 (C7H5NO3)를 추가합니다.;.

2) (approx16 시간) 아침까지 at37 Ｃ를 배양하거나 수조 (2 시간)까지 at56C를 배양하세요.

3) 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M 나오하와 6mL 아세트산 에틸을 30대를 위한 각각 튜브, 쉐이크에 더하세요.

4) 10 분 동안 실온 (20-25C)에 있는 4000r/min 이상 원심분리기는 유화가 있거나 초산에틸층이 3 밀리람베르트에 대해 충분하지 않(면, 반복해서 10 분과 원심분리기 동안 80C 수조에 표본을 배양하세요 ; 또는 증가는 원심분리기의) 시간을 가속시키고 확장합니다.

5) 아세트산 에틸의 열전달 3mL은 새로운 원심 튜브 안으로 층을 이루고, 50 Ｃ에 질소 또는 공기에 의해 건조로 증발합니다.

6) 건조 잔사를 2mL n-헥산에 녹이, 약해진 레디스솔비왕 솔루션 중 1mL, 적당히 30 초 동안 혼합, 10 분 동안 실온 (20-25 C)에 있는 4000r/min 이상 원심분리기가 덧붙입니다 ; 윗계층 n-헥산 단계를 제거하세요 (윗계층 n-헥산 단계를 제거한 후의, 유화가 있다고 10-20min, 반복해서 원심분리기를 위한 70C 수조에 있는 표본이 잠복하면).

7) 분석을 위한 더 낮은 것의 50 uL을 잡으세요.

샘플의 희석의 폴드 : 1

 

6. ELISA 절차

 

6.1 교육

1) 사용 전에 모든 시약과 마이그로 웰 스트립을 실온 (20-25 C)에 가져오세요 ;

2) 사용 뒤에 바로 모든 시약을 2-8 Ｃ로 되돌리세요 ;

3) 큰 도에, ELISA 해석의 재현성은 플레이트 세척의 일관성에 의존합니다. 플레이트 세척의 정동작 ELISA에서 핵심 사항이 절차이고 ;

4) 일정온도에 있는 인큐베이션을 위해, 모든 표본과 시약은 빛 노출을 피할 것이고 각각 마이크로플레이트가 덮개 막에 의해 밀봉되어야 합니다.

 

6.2 작업 과정

1) 적어도 30의 분을 위한 실온 (20-25' Ｃ)에 장비를 두고, 각각 시약이 사용 전에 잘 흔들리고 섞인다는 것에 주목하고, 필요한 마이크로웰 스트립을 플레이트 프레임에 넣으세요. 언유스드는 미소플레이팅하고 재봉해지고 동결되지 않는 2-8' Ｃ에 저장하여야 합니다.

2) 용액 사전 준비 : 20× 집중된 세척 버퍼의 40 mL을 잡고 1시 19분 (탈염수의 20× 집중된 세척 버퍼 + 19 부분의 1개 부분)에 그것을 탈염수로 희석시키세요. 또는 필요에 따라 준비합니다.

3) 달하는 것 : 표본과 표준 해결책에 따른 마이크로웰 수 ; 각각 표본과 표준 해결책은 정부 2통으로 만들어져야 하고 그들의 위치들이 기록되어야 합니다.

4) 50uL의 표본 또는 표준 해결책을 중복웰에 더하세요 ; 50ul의 효소 접합체를 추가하고에게 각각 잘, 그리고 나서 항체 사용 가능 솔루션 중 50uL을 추가하고, 점잖게 섞기 위한 플레이트를 흔듭니다. 마이크로플레이트를 커버 필름으로 밀봉하고 30 분 동안 25' Ｃ에 잠복하세요.

5) 마이크로웰에서 액체를 털어놓으시오 그러면 흡수지 위의 적절한 건식이, 15-30s를 위한 마이크로웰 판을 씻고 꺼내기 위한 버퍼를 씻는 250 μL/well과 흡수지와 적절한 건식이 덧붙이는데, 4-5 배 반복합니다. (똑똑 두드리는 것 뒤에 기포가 있다면, 깨끗한 팁으로 그들을 잘라내 세요).

6) 색상 개발 : 기판 A와 50 uL의 50 uL이 기판 비의 덧붙입니다에게 각각 잘. 점잖게 수작업으로 혼합되기 위해 플레이트를 흔들리고 색상 개발을 위해 어둠 속에서 15 분 동안 25' Ｃ에 잠복하세요.

7) 화나게 하세요 : 50 μL의 정지 용액을 추가합니다에게 각각 잘. 손으로 플레이트를 흔들음으로써 점잖게 혼합되세요. OD 가치를 결정하기 위해 450 nm에 대한 미소 평판 해독기의 사고 방식에서 설정합니다의 각각 잘. (그것은 5 분 이내에 이중 파장 450/630nm에 OD 가치를 읽는다고 추천받습니다).

 

7. 결과 심판

 

결과를 판단하기 위한 2가지 방법이 있습니다 : 첫번째 것이 거친 판단인 반면에, 초는 정량적 결정입니다. 샘플의 OD 가치가 SEM의 내용으로 네가티브 상관을 가지고 있다는 것에 주목하세요.

7.1 정성 측정

농도 범위 (ng/mL)는 일반적인 샘플의 OD 가치를 표준 해결책의 그것과 비교하는 것으로부터 획득될 수 있습니다. OD가 샘플이의 가치는 0.3 이고, 샘플이이의 그것은 1.0ppb 이라고 추정할 때, 표준 해결책의 OD 가치는 다음과 같습니다 : 0ppb를 위한 2.243, 0.02ppb를 위한 1.816, 0.06ppb를 위한 1.415, 0.18ppb를 위한 0.74, 0.54ppb를 위한 0.313, 1.62ppb를 위한 0.155가 따라서 샘플이의 농도 범위는 0.54 내지 1.62ppb이고 샘플이이의 그것이 0.06 내지 0.18ppb입니다.

7.2 정량적 결정

흡 광도 값의 평균 값은 일반적인 (0 기준) 첫번째 표준 해결책의 OD 가치 (B0)에 의해 나눠지고 다음에 100%까지 증가한 표본과 표준 해결책의 OD 가치 (B)에 대해 획득됩니다, 그것이 있습니다,

흡 광도 값의 비율 =	비	×100%
	B0

일반적인 샘플 또는 표준 해결책의 (이중 우물) OD 가치 비

B0 일반적인 0 ng/mL 표준 해결책의 OD 가치

각각 Y-축과 X-축으로서 표준 해결책의 흡수 백분율과 SEM 표준 해결책 (ng/mL)의 반로그 가치와 표준 곡선을 작성되세요. 그것의 흡수 백분율을 표준 곡선에 통합시킴으로써 표준 곡선으로부터의 샘플의 상응하는 집중을 읽으세요. 다음에 마침내 SEM 집중을 샘플에서 획득하면서, 결과값은 상응하는 희석 폴드에 의해 증가합니다.

 

8. 예방책

 

1) 만약 실온이 25C 보다 낮거나 시약 온도와 샘플이 실온 (20-25C)로 돌아가지 않으면, 표준 OD 가치가 떨어질 것입니다.

2) 세척 프로세스 동안, 마이크로플레이트의 건조는 표준 곡선의 비선형성을 동반할 것이고 재현성이 이상적이지 않습니다 ; 그러므로, 씻은 후 바로 다음 단계로 향하세요.

3) 다른 사람들과 친하게 지내시오 그러면 그렇지 않았다면 재현성은 가난할 것입니다.

4) 정지 용액은 2가지 Ｍ 황산 용액이고 스킨 접촉을 피합니다.

5) 판매 수명을 넘어서 장비를 사용하지 마세요. 장비로부터의 약해지거나 불순한 시약의 이용은 민감도와 검출 OD 가치의 변경의 결과가 될 수 있습니다. 장비의 다른 묶음에서 시약을 대체하지 마세요.

6) 사용하지 않은 레시일은 지플록식 가방에서 미소플레이팅합니다. 표준 해결책과 무색 커플러는 감광적이고, 빛을 직접적으로 향하고 있을 수 없습니다.

7) 색이 솔루션이 떨어진 것을 나타내는 어떠한 발색 용액도 포기하세요. 표준 해결책 1 (0 PPB (단위))를 위한 0.5하의 검출값은 퇴보를 보여줍니다.

8) 최적 반응은 온도는 25C이고 온도가 너무 높거나 너무 낮은지 검출 감도와 OD 가치가 바꿀 것입니다.

 

9. 저장과 예정 만료일

 

저장 : 2-8' Ｃ에 저장하고 얼지 마세요.
예정 만료일 : 12개월 ; 제조 일은 박스에 있습니다.
기록 : 마이크로플레이트 진공 포장 누출 면, 그것은 여전히 테스트 결과를 영향을 미치지 않고 사용될 수 있고 따라서 당신이 자신을 갖고 그것을 사용할 수 있습니다.

 

Q1 : 그럼 언제쯤 배송이 가능한가요?
A1 : 우리는 대금을 받은 후 7 근무일 이내에 최대한 빨리 당신을 위한 상품을 수송할 것입니다. (유행과 같은 외부 요인의 경우에, 배달은 연기될 수 있습니다)

 

Q2 : 그것은 OEM / ODM을 지원합니까?
A2 : 그것은 지원받을 수 있지만, 그러나 특정한 수량이 맞춤 제작품을 위해 편리한 100,000 작품 이상일 필요가 있습니다.

 

Q3 : 품질 관리의 관점에서 하는 당신의 공장은 어떻습니까?
A3 : 우리는 국가적으로 ISO9001과 ISO13485를 증명했습니다. 우리의 생산 과정은 최적 제품 품질을 보증하기 위해 표준 절차에 따릅니다.

 

Q4 : 애프터 서비스를 제공하는 방법?
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Q5 : 결제 방법이 무엇입니까?
A5 : 우리는 전신환에 의해 대금을 받습니다.

 

Q6 : 운반하는 방법?
A6 : 우리의 많은 협력 캐리어를 인용함으로써 당신을 위한 최고 배송 방법을 선택하고, 또한 당신의 요구조건에 따라 운반하세요.