탐지 우유 96Wells/Kit ISO9001을 위한 멜라민 빠른 ELISA 우유 시험 키트

검출 우유 96웰스/키트 ISO9001용 멜라민 ELISA 테스트 키트

 

1. 원리

이 테스트 키트는 샘플에서 멜라민을 검출하기 위한 간접 경쟁 효소 면역분석법을 기반으로 합니다.커플 링 항원은 마이크로 웰 스트라이프에 미리 코팅되어 있습니다.샘플의 멜라민과 미세 웰 스트라이프에 사전 코팅된 결합 항원은 항 멜라민 항체를 놓고 경쟁합니다.효소접합체 첨가 후 TMB 기질을 첨가하여 착색한다.테스트 샘플의 광학 밀도(OD) 값은 샘플의 멜라민 농도와 음의 상관관계가 있습니다.이 값을 표준 곡선과 비교한 후 멜라민 농도를 구합니다.

 

 

2.우유 테스트 키트구성품

1	미세 웰 스트립	제거 가능한 8개의 스트립이 있는 12개의 스트립 각각의 우물
2	6× 표준 용액(각각 1mL)	0ppb	0.5ppb
		1.5ppb	4.5ppb
		13.5ppb	40.5ppb
삼	스파이킹 표준 솔루션	1ppm	1ml
4	효소접합체	7ml	빨간 모자
5	항체 작업 솔루션	7ml	파란색 모자
6	기판 A	7ml	하얀 모자
7	기판B	7ml	검은 모자
8	솔루션 중지	7ml	노란 모자
9	10x 샘플 추출 A 솔루션	50ml	투명 캡
10	20x 샘플 추출 B 솔루션	50ml	파란색 모자
11	20배 농축 세척 버퍼	15ml	하얀 모자

 

3. 기술 사양

감도: 0.5ppb

인큐베이터 온도: 25℃

인큐베이터 시간: 30분~15분

탐지 한계:

버터, 사탕, 치즈 10ppb

교차 반응률:

멜라민 100%

회수율:

버터 90±25%

사탕, 치즈 95±25%

 

4. 필요하지만 제공되지 않는 자료

1) 장비: 마이크로플레이트 판독기, 프린터, 와류, 원심분리기, 측정용 피펫, 저울(상호감도 0.01g), 70℃ 수조

2) Micropipettors: 단일 채널 20~200 µL, 100~1000 µL;및 다채널 30~300 μl;

 

5. 샘플 전처리

주의 사항(전처리 전에 다음 사항을 처리해야 함)

1) 실험에는 일회용 팁만 사용할 수 있으며 다른 시약에 사용할 경우 팁을 교체해야 합니다.

2) 실험 전 각 실험장비는 실험결과에 지장을 주는 오염을 방지하기 위하여 깨끗이 세척하여야 하며, 필요시 재 세척하여야 한다.

솔루션 준비

1) 시료 추출 A 용액

1:9의 탈이온수로 10x 샘플 추출 A 용액을 희석합니다.

2) 샘플 추출 B 용액

1:19에서 탈이온수로 20x 샘플 추출 B 용액을 희석합니다.

 

5.1 버터

1) 신선한 버터 1g을 50ml 원심분리기 튜브에 넣고 샘플 추출 A 용액 5ml를 추가하고 70℃의 수조에서 5분 동안 배양하고 5분 동안 vortex 및 진탕하고 실온에서 5분 동안 4000r/min 이상에서 원심분리합니다.

2) 분석을 위해 50ul 하층액을 취한다.

샘플 희석 배수: 5

5.2 사탕, 치즈

1) 신선한 샘플 1g을 50ml 원심분리기 튜브에 넣고 샘플 추출 B 용액 5ml를 추가하고 70℃의 수조에서 5분 동안 배양하고 5분 동안 와동 및 진탕하고 실온에서 5분 동안 4000r/min 이상에서 원심분리합니다.

2) 분석을 위해 50ul 하층액을 취한다.

샘플 희석 배수: 5

 

6. ELISA 절차

6.1 지침

1 모든 시약과 미세 웰 스트립을 실온(20~25℃)으로 가져옵니다.

2 사용 후 즉시 모든 시약을 2-8℃로 되돌립니다.

3 ELISA 분석의 재현성은 대부분 플레이트 세척의 일관성에 달려 있습니다.플레이트 세척의 올바른 작동은 ELISA 절차의 핵심입니다.

4 일정한 온도에서의 배양을 위해 모든 시료와 시약은 빛 노출을 피해야 하며 각 마이크로플레이트는 커버 멤브레인으로 밀봉되어야 합니다.

6.2 작동 절차

1)테스트 키트를 실온(20-25℃)에 최소 30분 동안 두십시오. 각 시약은 사용하기 전에 균일하게 흔들어야 합니다.필요한 마이크로 웰 스트립을 플레이트 프레임에 넣습니다.사용하지 않은 마이크로플레이트를 다시 밀봉하여 2-8℃에서 냉동 보관하지 않음.

2)솔루션 준비: 20X 농축 세척 버퍼 15mL를 탈이온수와 함께 300mL로 희석하여 사용합니다.

삼)번호 매기기: 샘플 및 표준 용액에 따라 마이크로 웰에 번호를 매깁니다.각 샘플 및 표준 용액은 중복으로 수행해야 합니다.그들의 위치를 ​​기록합니다.

4)50µL의 샘플/표준 용액을 추가하여 중복 웰을 분리한 다음 50µL의 효소 접합체를 추가한 다음 각 웰에 50µL의 항체 작업 솔루션을 추가하고 적절하게 흔든 다음 커버 멤브레인으로 마이크로플레이트를 밀봉하고 25℃에서 30분 동안 배양합니다.

5)웰에서 액체를 붓고 희석된 세척 버퍼로 마이크로플레이트를 250 μL/웰에서 5-6회 세척합니다.매번 희석된 세척 완충액으로 웰을 15~30초 동안 담근 후 흡수지 위에서 펄럭여 건조시킵니다(펄럭인 후 기포가 있으면 깨끗한 팁으로 잘라냅니다)

6)착색: 기판 A 50µL를 추가한 다음 기판 B 50µL를 각 웰에 추가합니다.플레이트를 수동으로 흔들어서 부드럽게 혼합하고 착색을 위해 어두운 곳에서 25℃에서 15분 동안 배양합니다.

7)결정: 정지 용액 50µL를 각 웰에 추가합니다.플레이트를 수동으로 흔들어 부드럽게 섞습니다.마이크로플레이트 리더의 파장을 450nm로 설정하여 모든 웰의 OD 값을 결정합니다.(5분 이내에 이중 파장 450/630nm에서 OD 값을 읽는 것이 좋습니다).

 

7. 결과 판정

결과를 판단하는 방법에는 두 가지가 있습니다.첫 번째는 대략적인 판단이고 두 번째는 정량적 판단입니다.샘플의 OD 값은 멜라민 함량과 음의 상관 관계가 있습니다.

7.1 정성적 결정

농도 범위(ng/mL)는 검체의 평균 OD값과 표준액의 OD값을 비교하여 구할 수 있습니다.sampleⅠ의 OD값을 0.3, sampleⅡ의 OD값을 1.0으로 가정하면 표준용액의 OD값은 0ppb일 때 2.043, 0.5ppb일 때 1.604, 1.5ppb일 때 1.101, 4.5ppb일 때 0.512, 13.5ppb일 때 0.161이다. , 40.5ppb에 대해 0.055이므로 시료Ⅰ의 농도범위는 4.5~13.5ppb, 시료Ⅱ의 농도범위는 1.5~4.5ppb이다.

7.2 정량적 결정

흡광도 값의 평균값은 검체와 표준액의 평균 OD 값(B)의 백분율을 첫 번째 표준액(0 standard)의 OD 값(B0)으로 나눈 다음 100을 곱한 것과 같습니다. %, 그건

 

흡광도 값의 백분율 =	비	×100%
	B0

 

B - 테스트 샘플 또는 표준 용액의 평균(이중 웰) OD 값

B0 - 0ng/mL 표준 용액의 평균 OD 값

표준용액의 흡수율과 멜라민 표준용액의 반로그값(ng/mL)을 각각 Y축과 X축으로 하여 표준곡선을 그린다.흡수율을 표준 곡선에 통합하여 표준 곡선에서 테스트 샘플의 해당 농도를 읽습니다.결과 값에 해당 희석 배수를 곱하여 최종적으로 샘플의 멜라민 농도를 얻습니다.

 

8. 주의사항

1)실내 온도가 25℃ 미만이거나 시약 및 검사 시료의 온도가 실온(20-25℃)으로 되돌려지지 않으면 표준 OD 값이 낮아집니다.

2)세척 공정에서 마이크로플레이트의 건조는 비선형 표준 곡선 및 바람직하지 않은 재현성을 포함하는 상황을 동반합니다.따라서 세척 후 즉시 다음 단계를 계속하십시오.

삼)고르게 섞으십시오. 그렇지 않으면 바람직하지 않은 재현성이 있을 것입니다.

4)정지용액은 2M 황산용액으로 피부에 닿지 않도록 한다.

5)유효 기간이 지난 키트는 사용하지 마십시오.키트에서 희석되거나 불순물이 섞인 시약을 사용하면 감도와 감지 OD 값이 변경됩니다.사용하기 위해 다른 로트 번호의 키트에서 시약을 교환하지 마십시오.

6)사용하지 않은 마이크로플레이트를 자동 밀봉 백에 넣어 다시 밀봉합니다.표준물질과 무색 발색제는 빛에 민감하여 빛에 직접 노출되지 않는다.

7)이 용액의 변질을 나타내는 색상이 있는 착색 용액을 폐기하십시오.표준용액 1(0 ppb)검출값이 0.5 미만이면 변성이다.

8)최적의 반응 온도는 25℃이며 너무 높거나 낮은 온도는 감지 감도와 OD 값에 변화를 가져옵니다.

 

9. 보관 및 사용기한

보관: 2-8℃에서 보관, 냉동하지 않음.

만료 날짜: 12개월;생산일은 상자에 있습니다

참고: 마이크로플레이트의 진공 패키지에 누출이 있는 경우 여전히 사용할 수 있습니다. 테스트 결과에 영향을 주지 말고 편안하게 사용하십시오.

 

 

Q1: 배송까지 얼마나 걸립니까?
A1: 보통 영업일 기준 7일 이내에 배송됩니다.

 

Q2: OEM/ODM을 지원합니까?
A2: 지원할 수 있습니다.특정 요구 사항과 특정 수량에 따라 맞춤화할 수 있습니다.

 

Q3: 품질 관리 측면에서 귀사의 공장은 어떻습니까?
A3: 우리는 ISO9001 인증 및 ISO13485 인증을 보유하고 있습니다. 지금까지 모든 생산 공정에는 표준 규칙이 있으며 정부의 관련 행동 및 법률을 준수합니다.

 

Q4: 애프터 서비스가 보장됩니까?
A4: 전문적인 온라인 기술 애프터 서비스를 제공합니다.실험 중 제품이 실패하면 제공할 수 있습니다.
전화, 화상 등을 통한 1:1 안내.

 

Q5: 최소 주문 수량은 얼마입니까?
A5: 1키트.

 

Q6: 배송 방법은 무엇입니까?
A6: 익스프레스(FEDEX, UPS, DHL, EMS 등) 또는 항공 및 지상으로 배송될 수 있습니다. 주문하기 전에 당사에 확인하십시오.